Основа агара Бэйд-Паркера / с сульфаметазином М043

Baird Parker Agar Base

Состав**:

Ингредиенты M043
грамм/литр M1140
грамм/литр Гидролизат казеина 10,00 10,00 Мясной экстракт 5,00 5,00 Дрожжевой экстракт 1,00 1,00 Глицин 12,00 12,00 Натрия пируват 10,00 10,00 Лития хлорид 5,00 5,00 Сульфаметазин – 0,05 Агар-агар 20,00 20,00 Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 63,0 г порошка 950 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить 50 мл концентрированной суспензии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильного 3,5%-ного раствора теллурита калия (FD047) или 50 мл желточно-теллуритовой эмульсии (FD046). Тщательно перемешать и разлить в чашки Петри.

ОСТОРОЖНО: хлорид лития ядовит. Избегать контакта с ним и вдыхания паров. В случае попадания хлорида лития на кожу немедленно промыть большим количеством воды.

Принцип и оценка результата:

Среда разработана Baird-Parker (1, 2) как модификация теллурит-глициновой среды Zebovitz и соавт. (3) для выделения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов. Пируват натрия, защищая поврежденные микробные клетки, помогает выделению культуры. Хлорид лития и теллурит калия подавляют рост большинства сопутствующих микроорганизмов, кромеStaphylococcus aureus. Глицин и пируват натрия стимулируют рост стафилококков. После добавления желтка среда становится желтой и непрозрачной. За счет бактериальных протеаз вокруг соответствующих колоний на средах с желтком формируются прозрачные зоны. Диагностическим признаком коагулазоположительных стафилококков на этой среде является прозрачная зона вокруг серо-черных колоний. По мере дальнейшего инкубирования вокруг колоний формируется непрозрачная зона, что может быть связано с липолитической активностью микроорганизмов. По сравнению с другими средами, агар Бэйд-Паркера при той же селективности меньше подавляет рост Staphylococcus aureus (4, 5, 6). В связи с этим данная среда официально признана и рекомендуется компетентными организациями, в частности, для выделения и подсчета стафилококков (7, 8). Вместе с тем, окончательная идентификация Staphylococcus aureus, выделенных на этой среде, должна проводиться с учетом дополнительного теста на плазмакоагулазу. Показано (9), что добавление в среду 50 мг/мл сульфаметазина подавляет рост и роение протеев. Основу агара Бэйд-Паркера (М043) можно также использовать для определения коагулазной активности, если вместо суспензии желтка в среду добавить смесь плазмы и фибриногена. Для этого 375 мл бычьего фибриногена, 2,5 мл кроличьей плазмы, 2,5 мг ингибитора трипсина и 2,5 мг теллурита калия растворяют в 10 мл стерильной дистиллированной воды и добавляют к 90 мл стерильной расплавленной среды, выдержанной при 45-50°С (10). Тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри. Коагулазоположительные стафилококки на этой среде через 24-40 ч при 35°С образуют белые или серо-черные колонии, окруженные зоной помутнения. Ввиду отсутствия эмульсии желтка необходимо восстановление теллурита, что ведет к образованию стафилококками белых или серых колоний. Для количественной оценки выбирают чашки, где выросло 20-200 колоний. Подсчитывают колонии, похожие на колонии Staphylococcus aureus, и проверяют их на коагулазную активность. Колонии некоторых сопутствующих микроорганизмов могут способствовать уничтожению («разъеданию») коагулазного венчика. В случае отрицательного результата проводят дополнительные подтверждающие тесты. Результат выражают количеством Staphylococcus aureus в 1 г пищевого продукта.

Контроль качества:
Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Первоначально среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, а после добавления желточно-теллуритовой эмульсии (FD046) становится желтой и непрозрачной, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (6,3% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС) Рост Цвет колоний Лецитиназа Proteus mirabilis (25933)* Хороший
или обильный Коричнево-черные — Staphylococcus aureus (25923) Хороший
или обильный Серо-черные
блестящие + Staphylococcus epidermidis (12228) Слабый
или хороший Черные — Micrococcus luteus (10240) Слабый
или хороший Очень мелкие
коричнево-черные — Bacillus subtilis (6633) Слабый
или отсутствует Темно-коричневые матовые — Escherichia coli (25922) Слабый
или отсутствует Большие
коричнево-черные —

Примечание: * на среде М1140 протеи обычно не растут или дают слабый рост без роения

Характеристики основы агара Бэйд-Паркера / с сульфаметазином М043

• — Производитель: HiMedia
• — Страна производитель: Индия

Габариты и способ упаковки
Длина
20 см
Ширина
10 см
Высота
20 см
Вес
0.5 кг
Способ упаковки
Картонная упаковка